Janelas Pericárdicas: O Valor Limitado do Diagnóstico da Biópsia Pericárdica não Guiada / Pericardial Windows: The Limited Diagnostic Value of Non-Targeted Pericardial Biopsy

Resumo Fundamento A janela pericárdica, além de promover a drenagem pericárdica, também pode fornecer amostras do pericárdio para exame anatomopatológico. No entanto, a contribuição dessas biópsias para a elucidação da etiologia do derrame pericárdico tem sido debatida. Objetivo Analisar o valor diagnóstico da biópsia pericárdica não guiada obtida de procedimentos de janela pericárdica. Métodos Foram revisados retrospectivamente dados de 80 pacientes submetidos a biópsia pericárdica parietal de 2011 a 2020. A significância estatística foi considerada quando p < 0,05. Resultados Cinquenta pacientes eram do sexo masculino (62,5%) e 30 do sexo feminino (37,5%). A mediana de idade foi de 52 anos (intervalo interquartil: 29 a 59) e 49 anos (intervalo interquartil: 38 a 65), respectivamente (p = 0,724). A etiologia suspeita do derrame pericárdico foi neoplásica em 31,3%, incerta em 25%, tuberculose em 15%, autoimune em 12,5%, síndrome edemigênica em 7,5% e outras condições diversas em 8,8%. A abordagem mais frequente para drenagem pericárdica e biópsia foi a subxifoide (74%), seguida pela videotoracoscopia (22%). Em 78,8% das biópsias, os achados histopatológicos foram compatíveis com inflamação inespecífica, e apenas 13,7% de todas as biópsias produziram um diagnóstico histopatológico conclusivo. Aqueles que sofriam de câncer e derrame pericárdico apresentaram maior proporção de achados histopatológicos conclusivos (32% apresentavam infiltração neoplásica pericárdica). A taxa de mortalidade hospitalar foi de 27,5% e 54,5% dos pacientes que morreram no hospital tinham câncer. Nenhuma morte foi atribuída ao tamponamento cardíaco ou ao procedimento de drenagem. Conclusão Nossos resultados mostraram que a janela pericárdica é um procedimento seguro, mas teve pouco valor para esclarecer a etiologia do derrame pericárdico e nenhum impacto na terapia planejada para o diagnóstico primário além da descompressão cardíaca.

Abstract Background Pericardial window, in addition to promoting pericardial drainage, can also provide samples of the pericardium for anatomopathological examination. However, such biopsies' contribution to clarifying the etiology of pericardial effusion has been debated. Objective To analyze the diagnostic value of non-targeted pericardial biopsy obtained from pericardial window procedures. Methods Data from 80 patients who had undergone parietal pericardial biopsies from 2011 to 2020 were retrospectively reviewed. Statistical significance was considered if p < 0.05. Results Fifty patients were male (62.5%,) and 30 were female (37.5%). The median age was 52 years (interquartile range: 29 to 59) and 49 years (interquartile range: 38 to 65), respectively (p = 0.724). The suspected etiology of pericardial effusion was neoplastic in 31.3%, unclear in 25%, tuberculosis in 15%, autoimmune in 12.5%, edemagenic syndrome in 7.5%, and other miscellaneous conditions in 8.8%. The most frequent approach for pericardial drainage and biopsy was subxiphoid (74%), followed by video-assisted thoracoscopy (22%). Overall, in 78.8% of the biopsies, the histopathologic findings were compatible with nonspecific inflammation, and only 13.7% of all biopsies yielded a conclusive histopathological diagnostic. Those suffering from cancer and pericardial effusion had a higher proportion of conclusive histopathologic findings (32% had pericardial neoplastic infiltration). The hospital mortality rate was 27.5%, and 54.5% of the patients who died in the hospital had cancer. No deaths were attributed to cardiac tamponade or the drainage procedure. Conclusion Our results showed that pericardial window is a safe procedure, but it had little value to clarify the pericardial effusion etiology and no impact on the planned therapy for the primary diagnosis besides the cardiac decompression.

Antennal sensilla in Cyclocephala literata Burmeister, 1847 (Coleoptera: Scarabaeidae: Dynastinae) / Sensilas antenais em Cyclocephala literata Burmeister, 1847 (Coleoptera: Scarabaeidae: Dynastinae)

Abstract: Adults of the beetle Cyclocephala literata Burmeister, 1847 are important pollinators to some Magnoliaceae. Is known that insects could find host plants by detecting volatiles through antennal sensilla. Cyclocephala has its three distal antennomeres lamellate, and the surface of each lamella has sensilla trichodea, chaetica, placodea, coeloconica, basiconica and ampullacea. Three kinds of sensilla placodea were found (type I, II and III), and two kinds of sensilla coeloconica were observed (type I and II). Females have on average 10,776 sensilla, of which 10,214 are sensilla placodea, 536 are sensilla coeloconica, and 26 are sensilla basiconica. Males have on average 10,386 sensilla, of which 9,873 are sensilla placodea, 464 are sensilla coeloconica, and 49 are sensilla basiconica. Males and females have similar quantities of sensilla, and sensilla placodea are predominant. The differences observed in the number of sensilla of males and females were found in other beetles and were attributed to the detection of cospecific sexual pheromones by one of the sexes, or to the detection of plant volatiles. The antennal sensilla of C. literata is described and quantified in present study, and some perspectives about the differences kind of chemical communication, pollination, and antennae dimorphism is discussed.

Resumo: Adultos do besouro Cyclocephala literata Burmeister, 1847 desempenham importantes funções de polinização em plantas da família Magnoliaceae. É conhecido que muitos insetos encontram plantas hospedeiras pela detecção de voláteis pelas sensilas antenais. Cyclocephala possui os três antenômeros distais lamelados e na superfície de cada lamela possuem sensila trichodea, caética, placódea, coelocônica, basicônica e ampulacea. Foram encontrados três tipos de sensilas placódeas (tipo I, II e III), e dois tipos de sensilas coelocônicas (tipo I e II). Fêmeas apresentam em média 10.776 sensilas, das quais 10.214 são sensilas placódeas, 536 são sensilas coelocônicas e 26 são sensilas basicônicas. Os machos apresentaram em média 10.386 sensilas, das quais 9.873 são sensilas placódeas, 464 são sensilas coelocônicas e 49 são sensilas basicônicas. Machos e fêmeas apresentam quantidades semelhantes de sensilas e as sensilas placódeas são predominantes. As diferenças encontradas nas quantidades de sensilas em machos e fêmeas também foram encontradas em outros besouros e foram atribuídas a detecção de feromônios coespecíficos por um dos sexos, ou para detecção de voláteis de plantas. A sensila antenal de C. literata é descrita e quantificada no presente estudo, e algumas perspectivas sobre as diferenças entre os tipos de comunicação química, polinização e dimorfismo antenal é discutido.

Hemagglutination in gill capillaries of sheepshead, Archosargus probatocephalus (Perciformes: Sparidae), infected by a myxosporidean / Hemaglutinação em capilares branquiais de sargo-de-dente, Archosargus probatocephalus (Perciformes: Sparidae) infectado por um mixosporídeo

Abstract During a survey Myxozoa, four specimens of the sheepshead (18 ± 1.5 cm and 59 ± 2.5 g) (Archosargus probatocephalus) were collected in the Ipioquinha river (Maceió/AL). Transmission electron microscopy observations revealed erythrocyte agglutinations in gill capillaries located near spherical cysts containing myxospores of the genus Henneguya. This hemagglutination partially or totally obstructed the gill capillaries. Erythrocytes occurred in close adherence to each other, with a closed intercellular space. A few lysed erythrocytes were observed among agglutinated cells. The reduced lumen of the capillaries was partially filled with amorphous dense homogenous material adhering to the erythrocytes. In addition, heterogeneous masses of irregular lower electron density were observed in the reduced channel of the capillary. The agglutinated erythrocytes appeared dense and homogenous, lacking cytoplasmic organelles. The nuclei had the appearance of normal condensed chromatin masses, generally without visible nucleoli. This occurrence of hemagglutination only in the capillaries located in close proximity to the developing myxozoan cysts suggests that parasite development may be a factor triggering erythrocyte agglutination. This is supported by previous experimental studies that showed a probable correlation between parasitic infections and hemagglutination. Nonetheless, further studies are necessary in order to better understand the physicochemical processes involved in this phenomenon.

Resumo Durante pesquisa de mixozoários foram coletados quatro espécimes do peixes sargo-de-dente (18 ± 1.5 cm e 59 ± 2.5 g) (Archosargus probatocephalus), no rio Ipioquinha (Maceió/AL). Observações por microscopia eletrônica de transmissão revelaram aglutinação de eritrócitos em capilares branquiais localizados próximos a cistos esféricos, contendo mixosporos do gênero Henneguya. Essa hemaglutinação obstruiu parcial ou totalmente os capilares branquiais. Os eritrócitos apareceram em forte aderência entre si, com espaço intercelular fechado. Foram observados poucos eritrócitos lisados entre as células aglutinadas. O lúmen reduzido dos capilares foi parcialmente preenchido com material homogêneo denso amorfo aderido aos eritrócitos, além de massas livres heterogêneas de densidade eletrônica baixa e irregular observadas no canal reduzido dos capilares. Os eritrócitos aglutinados pareciam densos e homogêneos, sem organelas citoplasmáticas. Os núcleos apareceram como massas normais de cromatina condensada, geralmente sem nucléolos visíveis. A ocorrência de hemaglutinação apenas nos capilares, localizados nas proximidades dos cistos mixozoários, sugere que o desenvolvimento parasitário pode ser um fator desencadeante da aglutinação eritrocitária. Isso é corroborado por estudos experimentais anteriores que mostraram uma provável correlação entre infecções parasitárias e hemaglutinação. No entanto, novos estudos são necessários para melhor compreender os processos físico-químicos envolvidos neste fenômeno.

Ultrastructural and morphometric description of the ear skin and cartilage of two South American wild histricognate rodents (Dasyprocta leporina and Galea spixii) / Descrição ultraestrutural e morfométrica da pele e cartilagem auricular de dois roedores histricognatos silvestres da América do Sul (Dasyprocta leporina e Galea spixii)

Skin and cartilage have been the main source for the recovery of somatic cells to be used in conservation strategies in wild mammals. In this sense, an important step for the cryopreservation of these samples is to recognize the properties of the skin and cartilage. Thus, knowing that the skin may differ among species and aiming to contribute to the establishment of cryobanks, the study examined the differences in the ear skin and cartilage of wild rodents from South America, agouti (Dasyprocta leporina) and spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii). Ultrastructural and quantitative methods were used to measure skin and cartilage thickness, density of collagen and elastic fibers, cell type number and distribution, and proliferative activity. Although ultrastructural analysis revealed a similar pattern between species, morphometric analysis of the skin and cartilage showed differences between agoutis and cavies regarding thickness of epidermis layers (corneum: 5.3±2.5μm vs. 3.9±0.6μm; intermediate: 16.4±6.2μm vs. 23.4±8.1μm; basal: 9.9±2.1μm vs. 4.8±0.5μm), dermis (183.1±44.0μm vs. 258.2±22.9μm), total skin (211.8±46.0μm vs. 290.3±23.7μm) and perichondrium (27.6±6.1μm vs. 10.5±1.8μm). A greater number of epidermal cells (61.7±15.2 vs. 24.8±7.6) and chondrocytes (32.7±9.0 vs. 27.5±4.7) were observed in agouti, while the cavy presented a greater number of melanocytes (12.6±4.7 vs. 29.9±6.2), keratinocytes (14.7±4.2 vs. 29.8±7.6), and fibroblasts (103.6±24.7 vs. 112.2±11.3). Moreover, a higher percentage of collagen fibers and proliferative activity was observed in the skin of cavies, when compared to the skin of agoutis. Therefore, there are differences between agouti and cavy for ear skin and cartilage, requiring the establishment of species-specific cryopreservation protocols.(AU)

A pele e cartilagem têm sido uma importante fonte de recuperação de células somáticas a serem utilizadas em estratégias de conservação em mamíferos silvestres. Nesse contexto, uma importante etapa para criopreservação é conhecer, inicialmente, as propriedades que compõem a pele e cartilagem. Sabendo, então, que a pele pode diferir-se entre espécies e com o objetivo de contribuir para o estabelecimento de criobancos, o estudo evidenciou as diferenças da pele e da cartilagem do pavilhão auricular apical de cutias (Dasyprocta leporina) e preás (Galea spixii) que são roedores silvestres presentes na América do Sul. Para tanto, métodos ultraestruturais e quantitativos foram utilizados para mensurar a espessura da pele e da cartilagem, densidade de fibras colágenas e elásticas, número e distribuição dos tipos celulares e atividade proliferativa. Embora as propriedades ultraestruturais em cutias e preás tenham se mostrado semelhantes, avaliações acerca da morfometria da pele e da cartilagem demonstrou diferenças, especialmente nas camadas epidérmicas (córnea: 5,3±2,5μm vs. 3,9±0,6μm; espinhosa: 16,4±6,2μm vs. 23,4±8,1μm; basal: 9,9±2,1μm vs. 4,8±0,5μm), derme (183,1±44,0μm vs. 258,2±22,9μm), pele total (211,8±46,0μm vs. 290,3±23,7μm) e pericôndrio (27,6±6,1μm vs. 10,5±1,8μm). Além disso, um número maior de células epidérmicas (61,7±15,2 vs. 24,8±7,6) e condrócitos (32,7±9,0 vs. 27,5±4,7) foram observados em cutias, enquanto em preás um maior número de melanócitos (12,6±4,7 vs. 29,9±6,2), queratinócitos (14,7±4,2 vs. 29,8±7,6) e fibroblastos (103,6±24,7 vs. 112,2±11,3) foram evidenciados. Ainda, em preás, uma maior porcentagem de fibras colágenas e da atividade proliferativa foram observadas quando comparadas a pele de cutias. Portanto, existem diferenças entre cutias e preás para pele e cartilagem do pavilhão auricular, exigindo desta forma um estabelecimento de protocolos de criopreservação específica para cada uma destas espécies.(AU)

Age-associated hemogram and ultrastructural leukocyte morphology in Pygocentrus nattereri (Characiformes: Serrasalmidae) from the Brazilian Pantanal

Pygocentrus nattereri is a carnivorous fish widely distributed in the Brazilian wetland and occupies different river strata. Based on the sexual maturity, the standard length (SL) has been used to categorize age and physiological attributes. However, hematological parameters and their relationship with age and growth features are unknow. Here, the aim was to evaluate the hematological profile and leukocyte data of juvenile and adult specimens, associating it with SL. Specimens of both sexes were weighted, and SL were measured for classify as juveniles (SL ≤16.0 cm) and adults (SL ≥16.1 cm). Blood was collected to perform the hemogram, for leukocyte quantification and ultrastructural descriptions. In general, hemogram values and leukocyte, lymphocyte, and monocyte counts were high in juveniles. Hemogram variables were negatively correlated with SL. Thrombocyte and neutrophil counts were higher in adults than in juveniles. SL was correlated with leukogram variables. Ultrastructural analysis showed that granular leukocyte count in P. nattereri was similar another fishes. PAS-positive granular leukocytes are slightly smaller than neutrophils and are characterized by dense elongated and semi-lunar shapes in the cytoplasm. Our results suggest that age-based SL may be useful for the analysis of the relationship between P. nattereri health status and wetland aquatic environments.(AU)

Pygocentrus nattereri é um peixe carnívoro amplamente distribuído no pantanal brasileiro e ocupa diferentes estratos de rios. Com base na maturidade sexual, o comprimento padrão (CP) tem sido usado para categorizar a idade e os atributos fisiológicos. No entanto, os parâmetros hematológicos e sua relação com a idade e características de crescimento são desconhecidos. O objetivo foi avaliar o perfil hematológico e leucocitário de espécimes juvenis e adultos, associando-o ao CP. Espécimes de ambos os sexos foram pesados e os CPs foram medidos para classificação em juvenis (CP ≤16,0 cm) e adultos (CP ≥16,1 cm). Foi coletado sangue para realização do hemograma, perfil e morfologia dos leucócitos. Em geral, os valores do hemograma e as contagens de leucócitos, linfócitos e monócitos foram maiores nos jovens. A contagem de trombócitos e neutrófilos foi maior em adultos do que em jovens. A análise ultraestrutural mostrou que a contagem de leucócitos granulares em P. nattereri foi semelhante a outros peixes. Os leucócitos granulares PAS-positivos são menores do que os neutrófilos, sendo caracterizados por formas alongadas e semilunares densas no citoplasma. Nossos resultados sugerem que CP é útil para a análise da relação entre o estado de saúde de P. nattereri em ambientes aquáticos alagados.(AU)

The genus Tryblionella W. Smith (Bacillariaceae, Bacillariophyta) in southern Brazil salt marshes / O gênero Tryblionella W. Smith (Bacillariaceae, Bacillariophyta) em marismas do Sul do Brasil

Abstract: Tryblionella is a large epipelic genus, widespread from fresh to marine waters. Most of the studies including the genus are based only in light microscopy. Few recent studies are exclusively dedicated to Tryblionella and the ultrastructure of some species is still little known. In this paper we present eleven species of Tryblionella found in epiphyton and microphytobenthos in Patos Lagoon salt marshes. All the species are described, illustrated in light and scanning electron microscopy and comments about their taxonomy, distribution and ecology are provided. Two taxa are reported for the first time in the State of Rio Grande do Sul and one in Southern Brazil. The number of species registered in this study comprises nearly a half of the number of species registered in the country. The high richness observed may be related to the dynamics of the salt marshes, which provides both the mixing of fresh and marine waters communities and the diversity of microhabitats. The great variability among the species analyzed allowed to extend the general concept of Tryblionella, adding features which were not considered in the previous characterizations of the genus.

Resumo: Tryblionella é um gênero de diatomáceas epipélicas, distribuído de águas doces a marinhas. A maioria dos estudos que incluem o gênero baseia-se apenas em microscopia óptica. Poucos estudos recentes são exclusivamente dedicados à Tryblionella e a ultraestrutura de algumas espécies ainda é pouco conhecida. No presente artigo, apresentamos onze espécies de Tryblionella encontradas no epifíton e no microfitobentos nas marismas da Lagoa dos Patos. Todas as espécies foram descritas, ilustradas em microscopia óptica e eletrônica de varredura e comentários sobre a taxonomia, distribuição e ecologia foram fornecidos. Dois táxons foram registrados pela primeira vez para o estado do Rio Grande do Sul e um para a região Sul do Brasil. O número de espécies registradas neste estudo compreende cerca de metade das espécies registradas para o país. A grande riqueza observada pode estar relacionada à dinâmica das marismas, que proporciona tanto a mistura de comunidades de águas doces e marinhas quanto diversidade de microhabitats. A grande variabilidade entre as espécies analisadas permitiu que o conceito geral de Tryblionella fosse ampliado, incluindo características que não haviam sido consideradas nas caracterizações anteriores do gênero.

Assessment of remineralization potential of Theobromine and Sodium Fluoride gels on Artificial Caries like lesions / Avaliação do potencial de remineralização de géis de teobromina e fluoreto de sódio em lesões de cárie artificial

Objective: To compare the remineralization potential of theobromine and sodium fluoride gels on artificial caries like lesion. Materials and Methods: Forty longitudinal halves of human mandibular premolars were equally divided into 4 groups of 10 samples each: control group (C), samples were stored in distilled water during the experiment period. The remaining 30 specimens were subjected to demineralization protocol to create caries like lesions. samples were immersed for three days in a demineralization solution (pH 5.0) containing 0.2% carbopol and 0.1% lactic acid saturated with calcium phosphate tribasic. The samples were subdivided into 3 equal groups according to the treatment applied during the pH cycle. Demineralization group "D": no treatment applied. Group "F" treated with 2000 mg/liter sodium fluoride gel. Group "T" treated with 200 mg/liter theobromine gel. The specimens of the two studies groups were subjected to Demineralization- Remineralization PH Cycle Protocol for 5 days (Alternating four steps: 1: Treatment material, fluoride or theobromine ˜= 3 minutes. 2: Demineralizing solution 3 hours. 3: treatment material ˜= 3 minutes. 4: Remineralizing solution till the next cycle). The samples were investigated by scanning electron microscope (SEM) and energy dispersive x-ray analysis (EDXA). Results: The enamel of the demineralization group was porous with artificial caries like changes exposing the subsurface enamel rods with severe rod core defects. Theobromine gel and fluoride gel groups showed marked improvement in the surface characteristics in the enamel in both groups. Theobromine gel group showed more observable enamel surface improvement than the fluoride gel group. EDXA revealed that the calcium-phosphorus ratio displayed a descending order: (C > T > F > D). The differences between the two tested groups were not statistically significant. Conclusion: Theobromine gel had more effective remineralizing potential than fluoride gel as a result of its effect in improving the enamel surface characteristics of human teeth. (AU)

Objetivo: Comparar o potencial de remineralização dos géis de teobromina e fluoreto de sódio em lesões de cáries artificiais. Materiais e Métodos: Quarenta metades longitudinais de pré-molares inferiores humanos foram igualmente divididas em 4 grupos de 10 amostras cada: grupo controle (C), as amostras foram armazenadas em água destilada durante o período do experimento. As 30 amostras restantes foram submetidas ao protocolo de desmineralização paracriar lesões artificiais de cárie. As amostras foram imersas por três dias em uma solução de desmineralização (pH 5,0) contendo 0,2% de carbopol e 0,1% de ácido lático saturado com fosfato de cálcio tribásico. As amostras foram subdivididas em 3 grupos iguais, de acordo com o tratamento aplicado durante o ciclo do pH. Grupo de desmineralização "D": nenhum tratamento aplicado. Grupo "F" tratado com 2000 mg / litro de fluoreto de sódio em gel. Grupo & quot;T &q uot; tratado com 200 mg / litro de gel de teobromina. As amostras dos dois grupos de estudo foram submetidas ao protocolo de ciclo de desmineralização - remineralização por 5 dias (quatro etapas alternativas: 1: material de tratamento, flúor ou teobromina ˜= 3 minutos. 2: solução desmineralizante 3 horas. 3: material de tratamento ˜= 3 minutos 4: Solução de remineralização até o próximo ciclo). As amostras foram investigadas por microscopia eletrônica de varredura(MEV) e análise de raios-x dispersivos de energia (EDXA). Resultados: O esmalte do grupo de desmineralização era poroso, com cáries artificiais, como alterações que expunham as hastes de esmalte do subsolo com graves defeitos no núcleo da haste. Os grupos gel de teobromina e flúor apresentaram melhora acentuada nas características da superfície do esmalte nos dois grupos. O grupo gel de teobromina mostrou uma melhoria na superfície do esmalte mais observável do que o grupo gel de fluoreto. A EDXA revelou que a razão cálcio-fósforo exibia uma ordem decrescente: (C> T> F> D). As diferenças entre os dois grupos testados não foram estatisticamente significantes. Conclusão: O gel de teobromina teve um potencial remineralizante mais eficaz que o gel de flúor como resultado de seu efeito na melhoria das características da superfície do esmalte dos dentes humanos. (AU)

Morphobiological, morphometric and ultrastructural characterization of sylvatic Trypanosoma cruzi isolates from Rio de Janeiro state, Brazil / Caracterização morfobiológica, morfométrica e ultraestrutural de isolados silvestres de Trypanosoma cruzi do estado do Rio de Janeiro, Brasil

Abstract Triatoma vitticeps is a triatomine with geographic distribution restrict to Brazil, which exhibits high prevalence of Trypanosoma cruzi natural infection. Of special epidemiologic concern, this species often invades households in the states of Rio de Janeiro, Minas Gerais and Espírito Santo. The objective of this study was to evaluate morphological and ultrastructural parameters on three T. cruzi isolates obtained from wild T. vitticeps specimens. The growth and cell differentiation of the parasite was evaluated through epimastigote and trypomastigote forms obtained in the growth curves for three distinct isolates. The maximum growth showed differences at the 20th day of the curve. Our in vitro results show a heterogeneity, regarding these features for samples cultivated under the same conditions. Morphometric analyzes based on the shape of epimastigotes and trypomastigotes corroborated such differentiation. These results highlight the need of better understanding the meaning of this diversity under an eco-epidemiological perspective.

Resumo Triatoma vitticeps é um triatomíneo com distribuição geográfica restrita ao território brasileiro, apresentando alta prevalência de infecção natural pelo Trypanosoma cruzi. Esta espécie é relevante sob o ponto de vista epidemiológico por invadir domicílios com frequência nos estados do Rio de Janeiro, Minas Gerais e Espírito Santo. O objetivo deste estudo foi avaliar parâmetros morfológicos e ultraestruturais, em três isolados de T. cruzi obtidos a partir de triatomíneos silvestres. O crescimento e a diferenciação celular do parasita foi avaliado através das formas epimastigotas e tripomastigotas obtidas nas curvas de crescimento para os três isolados. O crescimento máximo mostrou diferenças no 20º dia da curva. Nossos resultados in vitro mostram uma heterogeneidade, em relação a essas características para amostras cultivadas nas mesmas condições. As análises morfométricas baseadas na conformação de epimastigotas e trypomastigotes corroboraram essa diferenciação. Estes resultados ressaltam a necessidade de uma melhor compreensão do significado desta diversidade sob uma perspectiva eco-epidemiológica.

Patogenia de mutantes de Salmonella Typhimurium en dos modelos experimentales in vivo / Pathogenesis of Salmonella Typhimurium mutants in two experimental models in vivo

Con la finalidad de evaluar la patogenia en cepas de Salmonella Typhimurium con mutaciones en los genes invG/invE de la Isla de Patogenicidad de Salmonella 1 (SPI-1) y de los genes ssaJ/ssaK en la SPI-2, se evaluaron los modelos asa intestinal ligada de ratón asociado a la observación de los tejidos por microscopía electrónica de transmisión (MET) y la producción de salmonelosis sistémica en ratón. Para ello, se utilizaron seis cepas de Salmonella: S. Typhimurium SL-1344 (cepa control) y sus derivadas mutantes: ∆invEG S. Typhimurium SL-1344 (mutante en SPI-1) y ∆ssaJK S. Typhimurium SL-1344 (mutante en SPI-2), S. Typhimurium (cepa clínica) y sus derivadas mutantes: ∆invEG S. Typhimurium y ∆ssaJK S. Typhimurium. Los resultados de MET permitieron verificar las alteraciones morfológicas del epitelio intestinal en el ratón infectado con cepas de Salmonella cuyos genes de patogenicidad estaban intactos. Fue comprobada la pérdida del poder invasivo solo en las cepas mutadas en la SPI-1. A través del modelo de salmonelosis sistémica en ratón se pudo comprobar la pérdida de la capacidad de diseminación en ambas mutantes. En conclusión los modelos permitieron verificar la importancia que tienen los genes invG/invE de la SPI-1 y ssaJ/ssaK de la SPI-2 en la patogenia de la salmonelosis, utilizando como modelo experimental de infección ratones BALB/c. Se sugieren estos modelos in vivo para evaluar mutantes de genes implicados en la patogenia de Salmonella, ya que representan una herramienta importante para la comprensión de la interacción Salmonella-hospedero(AU)

With the aim of evaluate the pathogenesis in Salmonella Typhimurium strains with mutations in genes invG/invE of Salmonella Pathogenicity Island 1 (SPI-1) and genes ssaJ/ssaK in the SPI-2 models were evaluated ligated intestinal loop associated mouse tissues by observation by transmission electron microscopy (TEM) and the production of mouse systemic salmonellosis. For this, we used six Salmonella strains: S. Typhimurium SL-1344 (control strain) and its derived mutants: ΔinvEG S. Typhimurium SL-1344 (mutant in SPI-1) and ΔssaJK S. Typhimurium SL-1344 (mutant in SPI-2), S. Typhimurium (clinical isolate) and its derived mutants: ΔinvEG S.Typhimurium and ΔssaJK S. Typhimurium. TEM results allowed us to verify the morphological alterations of the intestinal epithelium in mice infected with Salmonella strains whose pathogenicity genes were intact. It was proven invasive power loss only in strains mutated in the SPI-1. Through systemic salmonellosis model mouse we noted the loss of the ability to spread in both mutants. In conclusion, the models allowed us to verify the importance of the invG/invE genes of SPI-1 and ssaJ/ssaK of SPI-2 in the pathogenesis of salmonellosis, using BALB/c mice as an experimental model of infection. These in vivo models are suggested to evaluate mutants of genes involved in the pathogenesis of Salmonella, since they represent an important tool for the understanding of the Salmonella-host interaction(AU)

Morfologia da bolsa cloacal de emas, Rhea americana americana Linnaeus, 1758 / Morphology of rhea's cloacal bursa, Rhea americana americana Linnaeus, 1758

A bolsa cloacal é o órgão das aves responsável pela maturação e transferência de linfócitos para outros tecidos. Apesar da importância deste órgão nos mecanismos imunológicos desses animais, são escassas as informações a respeito de sua morfologia em emas. Neste estudo, objetivou-se descrever o desenvolvimento morfológico da bolsa cloacal de emas jovens. Utilizou-se 12 animais de ambos os sexos (6 machos e 6 fêmeas) para a microscopia de luz, eletrônica de transmissão e varredura. Microscopicamente, a bolsa cloacal da ema apresentou, em todas as idades a mucosa interna pregueada composta por lóbulos linfoides de diversos tamanhos, organizados como estrutura alveolar. Em cada prega verificou-se quatro componentes histológicos: as camadas mucosa, submucosa, muscular e adventícia. Esses lóbulos eram compostos de uma zona cortical, uma zona corticomedular e uma zona medular. Verificou-se a existência de linfócitos de tamanhos variados, linfoblastos, capilares sanguíneos, células reticulares epiteliais e macrófagos. Pela microscopia eletrônica de varredura, verificou-se que a superfície da mucosa dos lóbulos bursais apresentaram projeções poligonais, com a presença de curtas microvilosidades em toda a superfície. A comparação nas idades de 0 e 15 semanas de vida demostrou o desenvolvimento dos lóbulos bursais. O padrão morfológico da bolsa cloacal de emas difere do padrão comumente reportado para outras aves tais como pato selvagem, galinha da angola, ganso nativo, peru, codorna japonesa e falcão.(AU)

The cloacal bursa is the bird's organ responsible for maturation and transfer of lymphocytes to other tissues. Despite the importance of this organ in the immunological mechanisms of these animals, information about their morphology in rhea are scarce. We used 12 animals (6 males and 6 females) for light, transmission electron, and scanning microscopy. Microscopically, the cloacal bursa presented the inner mucosa consists of pleated lymphoid lobes of various sizes, organized as alveolar structure, in all ages. In each nail was found four histological components: mucosa, submucosa, muscular and adventitia layers. These lobes were composed of a cortical zone, a corticomedular zone and a medular area. It was verified the existence of varying sizes lymphocytes, lymphoblasts, blood capillaries, epithelial reticular cells and macrophages. By scanning electron microscopy, it was found that the mucous membrane surface of the bursal lobes showed polygonal projections, with the presence of short microvilli membranes throughout the surface. The comparison between 0 and 15 weeks demonstrated the development of the bursal lobes. The morphological pattern of the rhea cloacal bursa differs from standard commonly reported for other birds such as wild duck, Angola's chicken, native goose, turkey, Japanese quail, and Hawk.(AU)

Estimation, morphometry and ultrastructure of ovarian preantral follicle population in agouti (Dasyprocta leporina) / Morfometria, estimativa e ultraestrutura da população folicular ovariana preantral de cutia (Dasyprocta leporina)

The aim of this study was to characterize the preantral ovarian follicular population in agoutis (D. leporina) by estimating the number of follicles at each developmental category, and also describe the morphometry and the specific features of the follicle and the oocyte by using light and transmission electron microscopy. The length of each ovary was measured using a caliper rule, longitudinally sectioned into two halves and both were immediately fixed to perform the estimation of follicular population and ultrastructural analysis. The mean (±S.E.M.) population of follicular per pair of ovary was estimated at 4419.8±532.26 and 5397.52±574.91 for right and left ovaries, respectively, but no differences were observed between them. The diameters for follicles, oocyte and nuclei were: 18.62±3.40µm, 12.28±2.37µm and 6.10±0.93µm for primordial, 23.75±5.70µm, 14.22±3.00µm and 6.70±1.24µm for primary and 88.55±17.61µm, 52.85±17.56µm and 22.33±17.61µm for secondary follicles, respectively. The most of the follicles found belonged to the primordial category (86.63%), followed by primary (13.01%) and secondary (0.35%) one. Additionally, polyovular follicles were observed in all the animals and they represented 7.51% of the total follicles counted. The ultrastructural analysis showed that the oocyte presented a central and regular nuclei, displaying a homogenous mass. Among the organelles, the mitochondria were the most abundant and the oocyte Golgi apparatus was rarely observed. In conclusion, this work shows for the first time the characterization of the population of preantral follicles in the ovary of Dasyprocta leporina. Those information will be useful for further development and adaptation of biotechniques such as germplasm cryopreservation and in vitro gametes manipulation.(AU)

O objetivo deste trabalho foi caracterizar a população folicular ovariana pré-antral em cutias (D. leporina) estimando o número de folículos em cada categoria de desenvolvimento, e também descrever a morfometria e as características específicas do folículo e oócito usando microscopia de luz e eletrônica de transmissão. O comprimento de cada ovário foi medido utilizando um paquímetro, seccionados longitudinalmente em duas metades e ambos foram imediatamente fixados para realizar a estimativa da população folicular e análise ultraestrutural. A média (±S.E.M.) da população folicular por par de ovário foi estimada em 4419,8±532,26 e 5397,52±574,91 nos ovários direito e esquerdo, respectivamente, mas não foram observadas diferenças entre eles. Os diâmetros dos folículos, oócito e núcleos, respectivamente, foram: 18,62±3,40µm, 12,28±2.37µm e 6,10±0,93µm para primordial, 23,75±5,70µm, 14,22±3,00µm e 6,70±1,24µm para primário e 88,55±17,61µm, 52,85±17,56µm e 22,33±17,61µm de folículos secundários. A maioria dos folículos encontrados pertencia à categoria primordial (86,63%), seguido pelo primário (13,01%) e um secundário (0,35%). Adicionalmente, os folículos poliovulares foram observados em todos os animais e representavam 7,51% do total de folículos contados. A análise ultra-estrutural mostrou que o oócito apresentou núcleos centrais e regulares, exibindo uma massa homogênea. Dentre as organelas, as mitocôndrias foram as mais abundantes e o aparelho de Golgi do oócito foi raramente observado. Em conclusão, este trabalho mostra pela primeira vez a caracterização da população de folículos pré-antrais do ovário da Dasyprocta leporina. Essas informações serão úteis para o desenvolvimento e adaptação de biotécnicas, como a criopreservação de germoplasma e manipulação de gametas in vitro.(AU)

Typology and distribution of antennal sensory organs of adults Haematobia irritans of the Midwest Region of Brazil / Tipologia e distribuição de órgãos sensilares de Haematobia irritans adultas do Centro-Oeste do Brasil

Considering the great economic and sanitarian importance of Haematobia irritans − the development of resistance of this species to the main chemical insecticides used in its control, in several other localities of the world; as well as that different strains of the same species frequently present different types and distribution patterns −, the present aim study was to investigate the typology and distribution of different types of sensillae of H. irritans adults, from populations of this fly present in Brazilian Midwest, with emphasis on olfactory sensillae. This study provides new data on the typology and sensillary distribution of antennal sensilla of this fly. In the antennal segments were found non-innervated spinules and ten subtypes of sensilla: long bristles sensillum, long basiconic sensillum, blunt coeloconic sensillum, clavate coeloconic sensilla − single-tip and double-tip subtypes −, grooved coeloconic sensillum, long grooved coeloconic sensillum, trichoid sensillum, coeloconic sensillum, and smaller basiconic sensillum. A slight sexual dimorphism was observed in the antennal sensillae of H. irritans. These results provide a morphological basis for future investigations on olfactory-mediated behavior of this species, and could assist future studies for the development of alternative measures to the monitoring and control of this fly populations, with less environmental impact.(AU)

Considerando a grande importância econômica e sanitária de Haematobia irritans, o desenvolvimento de resistência desta espécie aos principais inseticidas químicos utilizados em seu controle, em diversas outras localidades do mundo, bem como que diferentes cepas de uma mesma espécie frequentemente apresentam diferentes tipos e padrões de distribuição sensilares, objetivou-se no presente trabalho investigar a tipologia e a distribuição dos diferentes tipos e subtipos sensilares de adulttos de H. irritans, oriunda de populações desta mosca presentes no centro-oeste brasileiro, com ênfase nas sensilas olfatórias. Este estudo apresenta novos dados sobre a tipologia e distribuição sensilar da antenna desta mosca. Em seus segmentos antenais foram observados pilosidades não enervadas e dez subtipos de sensilas, sendo: long bristles sensillum, long basiconic sensillum, blunt coeloconic sensillum, clavate coeloconic sensilla - single-tip and double-tip subtypes -, grooved coeloconic sensillum, long grooved coeloconic sensillum, trichoid sensillum, coeloconic sensillum, e smaller basiconic sensillum. Leve dimorfismo sexual foi observado em relação às sensilas antenais de H. irritans. Estes resultados fornecem uma base morfológica para futuras investigações sobre o comportamento mediado pelo olfato desta espécie, e poderão fomentar futuros estudos para desenvolvimento de medidas alternativas de monitoramento e controle de populações dessa mosca, com menor impacto.(AU)

Gomphonema Ehrenberg (Bacillariophyceae, Gomphonemataceae) of the São Francisco Falso River, Paraná, Brazil / Gomphonema Ehrenberg (Bacillariophyceae, Gomphonemataceae) do rio São Francisco Falso, Paraná, Brasil

Abstract: Gomphonema Ehrenberg is a genus well represented in periphytic algal flora of epicontinental environments. The substrate colonization is facilitated by the secretion of mucilage by the pore field, allowing cell adhesion. Samples were scraped off and analyzed from vegetative portions of the macrophyte Eichhornia azurea Kunth, collected in São Francisco Falso River, located in Santa Helena City, Paraná State. The sampling occurred in four different sites, in four different periods, totaling 16 samples. The quantitative material analysis resulted in 28 identified taxa, in which Gomphonema brasiliense ssp. pacificum, Gomphonema neoapiculatum Lange-Bertalot, Reichardt & Metzeltin Gomphonema pantropicum Reichardt and Gomphonema perapicatum Metzeltin & Lange-Bertalot represented pioneer citations for Paraná diatomflorula. The ultrastructure observations of some species were crucial to distinguish a few taxa, as Gomphonema brasiliense and Gomphonema brasiliensoide D. Metzeltin, Lange-Bertalot & F. García-Rodríguez. We suggest future studies in this environment, once it has propitious characteristics to the development of epilithic diatoms. Moreover, phylogenetic studies are also recommended for a better distinction of taxa with a wide morphologic variation.

Resumo: Gomphonema Ehrenberg é um gênero bem representado na flora algal perifítica de ambientes epicontinentais. A colonização de substratos é facilitada pela secreção de mucilagem pelo campo de poros permitindo a adesão das células. As amostras analisadas foram removidas das porções vegetativas da macrófita Eichhornia azurea Kunth, coletadas no rio São Francisco Falso, localizado no município de Santa Helena, Paraná. As coletas ocorreram em quatro estações de amostragem, em quatro períodos diferentes, totalizando 16 amostras. A análise qualitativa do material resultou na identificação de 28 táxons, sendo que Gomphonema brasiliense ssp. pacificum, Gomphonema neoapiculatum Lange-Bertalot, Reichardt & Metzeltin Gomphonema pantropicum Reichardt e Gomphonema perapicatum Metzeltin & Lange-Bertalot constituíram citações pioneiras para a diatomoflórula do Paraná. As observações da ultra-estrutura de algumas espécies foram decisivas para distinção entre alguns táxons, como por exemplo, Gomphonema brasiliense Grunow e Gomphonema brasiliensoide D. Metzeltin, Lange-Bertalot & F. García-Rodríguez. Sugerem-se futuros estudos desse ambiente, uma vez que o mesmo possui características propícias ao desenvolvimento de diatomáceas epilíticas, além de estudos filogenéticos para melhor distinção dos táxons com ampla variação morfológica.

Ultrastructure of bovine placenta during all gestational period / Ultraestrutura de placenta bovina durante todo o período gestacional

Placentas from pregnant cows with different gestation periods were used. Placental fragments of all groups were processed and evaluated by transmission electron microscopy. After fragment analysis, bovine placenta was observed to be epitheliochorial type in early pregnancy, becoming progressively sinepiteliocorial at the beginning of the second trimester. There are no ultrastructural evidences of inflammation in the region of caruncles throughout gestation, despite the invasion of caruncle proper lamina by trophoblast cells. However, throughout pregnancy and especially at the end, there were evident signs of cell degeneration in both trophoblast and the uterine epithelium. The active trophoblast cells intensely phagocytize cellular debris. There are complex interdigitations between the surface of the trophoblast and the uterine epithelium, which is related to the increase of the exchange surface between mother and fetus. At the end of pregnancy, interdigitations disappear, favoring the detachment and expulsion of the placenta after birth.(AU)

Foram utilizadas placentas de vacas abatidas em frigorífico com diversos tempos gestacionais. Fragmentos de placentomo de todos os grupos foram processados e avaliados em microscopia eletrônica de transmissão. Após análise dos fragmentos, observou-se que a placenta bovina é do tipo epiteliocorial no início da gestação, tornando-se sinepiteliocorial progressivamente a partir do início do segundo mês de gestação. Não existem evidências ultraestruturais de inflamação na região das carúnculas durante toda a gestação, apesar da invasão da lâmina própria caruncular por células trofoblásticas. No entanto, durante toda a gestação e em especial ao seu final, foram observados sinais evidentes de degeneração celular, tanto do trofoblasto como do epitélio uterino. As células trofoblásticas ativas fagocitam intensamente os debris celulares originados dessas degenerações. Existem complexas interdigitações entre a superfície do trofoblasto e do epitélio uterino, o que estaria relacionado com o aumento da superfície de troca entre mãe e feto. Ao final da gestação, praticamente desaparecem essas interdigitações, favorecendo o descolamento e a expulsão da placenta após o parto.(AU)

Ex vivo model of rabbit intestinal epithelium applied to the study of colonization by enteroaggregative escherichia coli / Modelo ex vivo de epitélio intestinal de coelho aplicado ao estudo de colonização por Escherichia coli enteroagregativa

ABSTRACT BACKGROUND The diarrheal syndrome is considered a serious public health problem all over the world and is considered a major cause of morbidity and mortality in developing countries. The high incidence of enteroaggregative Escherichia coli in diarrheal syndromes classified as an emerging pathogen of gastrointestinal infections. After decades of study, your pathogenesis remains uncertain and has been investigated mainly using in vitro models of adhesion in cellular lines. OBJECTIVE The present study investigated the interaction of enteroaggregative Escherichia coli strains isolated from childhood diarrhea with rabbit ileal and colonic mucosa ex vivo, using the in vitro organ culture model. METHODS The in vitro adhesion assays using cultured tissue were performed with the strains co-incubated with intestinal fragments of ileum and colon over a period of 6 hours. Each strain was tested with three intestinal fragments for each region. The fragments were analysed by scanning electron microscopy. RESULTS Through scanning electron microscopy we observed that all strains adhered to rabbit ileal and colonic mucosa, with the typical aggregative adherence pattern of “stacked bricks” on the epithelium. However, the highest degree of adherence was observed on colonic mucosa. Threadlike structures were found in greater numbers in the ileum compared to the colon. CONCLUSION These data showed that enteroaggregative Escherichia coli may have a high tropism for the human colon, which was ratified by the higher degree of adherence on the rabbit colonic mucosa. Finally, data indicated that in vitro organ culture of intestinal mucosa from rabbit may be used to elucidate the enteroaggregative Escherichia coli pathogenesis.

RESUMO CONTEXTO A síndrome diarréica é considerada um grave problema de saúde pública em todo o mundo e é considerada uma das principais causas de morbidade e mortalidade nos países em desenvolvimento. A elevada incidência de Escherichia coli enteroagregativa nas síndromes diarreicas a classificou como um patógeno emergente de infecções gastrintestinais. Depois de décadas de estudo, sua patogênese ainda é incerta e tem sido investigada usando principalmente modelos in vitro de adesão em linhagens celulares. OBJETIVO O presente estudo investigou a interação de cepas de Escherichia coli enteroagregativa isoladas de diarreia infantil com mucosa ileal e colônica de coelho ex vivo, utilizando o modelo de cultura de órgão in vitro. MÉTODOS Os ensaios de adesão in vitro utilizando tecido cultivado foram realizados com as cepas co-incubadas com fragmentos intestinais de íleo e de cólon durante um período de 6 horas. Cada cepa foi testada em três fragmentos intestinais para cada região. Os fragmentos foram analisados por microscopia eletrônica de varredura. RESULTADOS Através da microscopia eletrônica de varredura observamos que todas as cepas aderiram a mucosa ileal e colônica de coelho, com o padrão de aderência agregativo típico de “tijolos empilhados” no epitélio. Entretanto, o maior grau de adesão foi observado na mucosa do cólon. Estruturas filiformes foram encontradas em maior número no íleo em comparação com o cólon. CONCLUSÃO Esses dados mostraram que Escherichia coli enteroagregativa pode ter um maior tropismo para o cólon humano, o que foi ratificado pelo maior grau de aderência na mucosa do cólon de coelho. Finalmente, os dados indicaram que a cultura de órgão in vitro da mucosa intestinal de coelho pode ser utilizado para elucidar a patogênese de Escherichia coli enteroagregativa.

Midgut of the diplopod Urostreptus atrobrunneus: structure, function, and redefinition of hepatic cells / Intestino médio do diplópodo Urostreptus atrobrunneus: estrutura, função e redefinição das células hepáticas

Abstract Diplopods are considered important macroarthropods the soil as part of its maintenance and balance. These animals usually do not occur in high densities, but population explosions caused by environmental disturbances, climate changes, and use of pesticides that eliminate possible competitors, have been reported. The millipede Urostreptus atrobrunneus Pierozzi and Fontanetti, 2006 have become a nuisance to humans in infestation sites in urban centers of the state of Sao Paulo, Brazil. As a contribution to the understanding of this potential pest, this study describes the histology, histochemistry, and ultrastructure of the U. atrobrunneus midgut, and presents the redefinition of hepatic cells somewhat controversial in the literature. The region of the midgut is characterized by the absence of a cuticular intima, and composed of a pseudostratified epithelium on a thick basal membrane, followed by a muscle layer, a layer of hepatic cells, lined by an external membrane. The morphology observed in U. atrobrunneus is similar to that reported for other species of diplopods. The hepatic cells have been previously described as randomly without forming a layer, however, the present results clearly demonstrate that these cells form a continuous layer over the whole midgut.

Resumo Diplópodos são considerados importantes macro-artrópodes do solo, uma vez que participam de sua manutenção e equilíbrio. Comumente estes animais não apresentam população numerosa, porém há relatos de explosões populacionais ocasionadas por desequilíbrios ambientais, mudanças climáticas e utilização de pesticidas que eliminam possíveis competidores. O milípede Urostreptus atrobrunneus Pierozzi e Fontanetti, 2006, têm apresentado pontos de infestação em centros urbanos, do estado de São Paulo, Brasil, causando muitos transtornos à população humana. Com objetivo de contribuir para o conhecimento desta potencial praga, este trabalho apresenta a descrição histológica, histoquímica e ultra-estrutural do intestino médio do milípede U. atrobrunneus, bem como apresenta a redefinição das células hepáticas, um tanto controversa na literatura pertinente. A região do intestino médio é caracterizada pela ausência da íntima cuticular, sendo formado por um epitélio pseudoestratificado, apoiado por uma membrana basal espessa, seguido de uma camada muscular, uma camada de células hepáticas, revestido por uma membrana externa. A morfologia observada neste trabalho assemelha-se bastante com as descrições de outras espécies de diplópodos estudadas até o momento. As células hepáticas foram previamente descritas como dispostas aleatoriamente sem a formação de uma camada, contudo, os presentes resultados demonstram claramente que estas células formam uma camada contínua ao longo de todo o intestino médio.

Morphobiological, morphometric and ultrastructural characterization of sylvatic Trypanosoma cruzi isolates from Rio de Janeiro state, Brazil

Abstract Triatoma vitticeps is a triatomine with geographic distribution restrict to Brazil, which exhibits high prevalence of Trypanosoma cruzi natural infection. Of special epidemiologic concern, this species often invades households in the states of Rio de Janeiro, Minas Gerais and Espírito Santo. The objective of this study was to evaluate morphological and ultrastructural parameters on three T. cruzi isolates obtained from wild T. vitticeps specimens. The growth and cell differentiation of the parasite was evaluated through epimastigote and trypomastigote forms obtained in the growth curves for three distinct isolates. The maximum growth showed differences at the 20th day of the curve. Our in vitro results show a heterogeneity, regarding these features for samples cultivated under the same conditions. Morphometric analyzes based on the shape of epimastigotes and trypomastigotes corroborated such differentiation. These results highlight the need of better understanding the meaning of this diversity under an eco-epidemiological perspective.

Resumo Triatoma vitticeps é um triatomíneo com distribuição geográfica restrita ao território brasileiro, apresentando alta prevalência de infecção natural pelo Trypanosoma cruzi. Esta espécie é relevante sob o ponto de vista epidemiológico por invadir domicílios com frequência nos estados do Rio de Janeiro, Minas Gerais e Espírito Santo. O objetivo deste estudo foi avaliar parâmetros morfológicos e ultraestruturais, em três isolados de T. cruzi obtidos a partir de triatomíneos silvestres. O crescimento e a diferenciação celular do parasita foi avaliado através das formas epimastigotas e tripomastigotas obtidas nas curvas de crescimento para os três isolados. O crescimento máximo mostrou diferenças no 20º dia da curva. Nossos resultados in vitro mostram uma heterogeneidade, em relação a essas características para amostras cultivadas nas mesmas condições. As análises morfométricas baseadas na conformação de epimastigotas e trypomastigotes corroboraram essa diferenciação. Estes resultados ressaltam a necessidade de uma melhor compreensão do significado desta diversidade sob uma perspectiva eco-epidemiológica.

Identification of ultrastructural and functional damages in sperm from six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus) due to cryopreservation / Identificação de danos ultraestruturais e funcionais em espermatozoides de tatus-peba (Euphractus sexcinctus) oriundos da criopreservação

The aim of the study was to cryopreserve the semen of six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus) in Tris-yolk and glycerol diluent, and to determine the damage caused by the freezing-thawing process, using fluorescent markers and ultrastructural analysis. Semen samples (n=11) collected from 4 adult six-banded armadillos by electroejaculation were cryopreserved in Tris diluent plus 20% egg yolk and 3% glycerol, in a fast freezing curve. Classical analysis of samples was performed after dilution, refrigeration and thawing, followed by fluorescence analysis, using a combination of fluorescent probes to assess membrane integrity (propidium iodide - PI and Hoechst - H342), and mitochondrial activity (CMXRos - Mito Tracker Red®). We also used the ultrastructural analysis to verify possible morphological alterations caused by cryoinjuries. When compared with fresh samples, we verified a significant decline in all the armadillos' semen parameters after thawing, in which only 6.1% motile sperm were found. However, the percentage of sperm which remained with viable (13%) and functional (24.7%) membranes after thawing suggests that some cells could be live but immotile. Analysis using fluorescent markers revealed that the mitochondria of armadillos' sperm is highly sensible to the freezing protocol and the findings through ultrastructure analysis proved this statement. Additionally, the images obtained by transmission electron microscopy revealed that frozen-thawed sperm presented damaged plasma membrane, nuclear modifications as changes in chromatin and acrossomal changes relative to sperm capacitation. In conclusion, this study is the first attempt to cryopreserve the semen of an armadillo species, and to help us to identify critical points on the freezing-thawing procedure in order to improve the protocol.(AU)

O objetivo deste estudo foi criopreservar o sêmen de tatus-peba (Euphractus sexcinctus) em diluente Tris-gema e glicerol, e determinar os danos causados pelo processo de congelação-descongelação, utilizando marcadores fluorescentes e análise ultraestrutural. As amostras de sêmen (n=11) coletadas de 4 tatus-peba adultos por eletroejaculação foram criopreservadas em diluente Tris acrescido de 20% de gema de ovo e 3% de glicerol, em curva rápida de congelação. A análise clássica das amostras foi realizada após a diluição, refrigeração e descongelação, seguida por análise de fluorescência, utilizando uma combinação de sondas fluorescentes para avaliar a integridade da membrana (Iodeto de Propídio - PI e Hoechst - H342), e a atividade mitocondrial (CMXRos - Mito Tracker RED®). Foi também utilizada a análise ultraestrutural para verificar possíveis alterações morfológicas causadas pela crioinjúria. Quando comparadas com as amostras a fresco, verificou-se uma queda significativa em todos os parâmetros seminais dos tatus após a descongelação, em que apenas 6,1% de espermatozoides móveis foram encontrados. No entanto, o percentual de espermatozoides que permaneceu com membrana viável (13%) e funcional (24,7%) após a descongelação sugere que algumas células podem estar vivas, mas imóveis. Análises utilizando marcadores fluorescentes revelaram que as mitocôndrias dos espermatozoides de tatus são altamente sensíveis ao protocolo de congelação e os achados através da análise ultraestrutural comprovaram esta afirmação. Além disso, as imagens obtidas por microscopia eletrônica de transmissão revelaram que espermatozoides congelados-descongelados apresentaram membranas plasmáticas danificadas, modificações nucleares como alterações na cromatina, e alterações acrossomais relativas à capacitação espermática. Em conclusão, este estudo é a primeira tentativa de criopreservação de sêmen em uma espécie de tatu, e nos auxiliou a identificar pontos críticos no processo de congelação-descongelação, a fim de melhorar o protocolo.(AU)

Ultrastructural lesions in the myocardium and kidneys of rabbits in experimental acute Amorimia exotropica poisoning / Lesões ultra-estruturais no miocárdio e rins de coelhos na intoxicação experimental aguda por Amorimia exotropica

Amorimia exotropica is an important plant associated with sudden death in cattle in Southern Brazil. In order to understand the mechanisms by which A. exotropica causes acute lesions in the heart and kidney of intoxicated animals, an experiment was conducted to determine the histopathology and ultrastructure of myocardial and renal lesions of intoxicated rabbits. After receiving 18g/kg of dried plant, six rabbits died suddenly. At necropsy, the liver was swollen and no other macroscopic lesions were observed. Histologically, centrolobular and midzonal hepatocytes were vacuolated. These vacuoles were strong PAS stained positive, suggesting that they corresponded to glycogen accumulations. In some regions of the ventricular septum and ventricles were found vacuoles of different sizes and the kidneys of two rabbits showed vacuolar degeneration on distal convoluted tubules. Ultrastructurally, the myocardium had cardiomyocytes swelling with separation of myofibrils bundles and rupture and disorganization of the sarcomeres. The mitochondria displayed swelling, disorganization, disruption of the mitochondrial cristae, and electron-dense matrix. Some mitochondria exhibited eccentric projections of their membranes with disruption of both outer and inner membranes. The sarcoplasmic reticulum had no alterations, whereas the T-tubule system was occasionally dilated and ruptured. The kidneys had mitochondrial swelling with disorganization and disruption of the mitochondrial cristae. The vacuoles result from the swelling of the endoplasmatic reticulum and usually were located between two basolateral infoldings and mitochondria, occurring preferentially around the nucleus. The myocytes and T system damages induced by A. exotropica result in acute heart failure and death. Furthermore, this mechanism of cardiotoxicity may be common to all plant containing monofluoroacetate.

Amorimia exotropica é uma importante planta associada à morte súbita em bovinos no Sul do Brasil. Visando compreender os mecanismos pelos quais a A. exotropica provoca lesões agudas no coração e rins de animais intoxicados, foi conduzido uma intoxicação experimental em coelhos para determinar a histopatologia e ultraestrutura da lesão miocárdica e renal. Depois de receber 18g/kg de planta seca, seis coelhos morreram subitamente. Na necropsia, o fígado apresentava acentuação do padrão lobular. Os demais órgãos não apresentaram alterações macroscópicas. Histologicamente, os hepatócitos centrolobulares e mediozonais estavam vacuolizados e coraram-se fortemente com PAS. Em algumas regiões foram observados vacúolos de diferentes tamanhos no septo ventricular e ventrículos e os rins de dois coelhos mostraram degeneração vacuolar nos túbulos contorcidos distais. Ultraestruturalmente, o miocárdio apresentou cardiomiócitos tumefeitos com separação das bandas de miofibrilas e ruptura e desorganização dos sarcômeros. As mitocôndrias estavam tumefeitas exibindo desorganização das cristas mitocondriais, e a matriz estava eletrodensa. Algumas mitocôndrias exibiam projecções excêntricas das suas membranas com ruptura das membranas externas e internas. O retículo sarcoplasmático não tinha alterações, e os túbulos T estavam ocasionalmente dilatados e rompidos. Os rins apresentavam tumefação mitocondrial com desorganização e ruptura das cristas mitocondriais. Os vacúolos resultam da expansão do retículo endoplasmático e foram localizados geralmente entre duas invaginações basolaterais e as mitocôndrias, ocorrendo preferencialmente ao redor do núcleo. A lesão nos miócitos e o dano no sistema T induzido pela A. exotropica resultam na insuficiência cardíaca aguda e morte. Este mecanismo de cardiotoxicidade pode ser comum a todas as plantas contendo monofluoroacetato.

Melosira (Diatomeae) taxa from the Iguaçu River in southern Brazil / Táxons de Melosira (Diatomeae) para o rio Iguaçu, sul do Brasil

Abstract The study of the genus Melosira in plankton samples from the lower Iguaçu River revealed the presence of four taxa: Melosira undulata (Ehrenberg) Kützing var. undulata, M. undulata var. normanni Arnott, M. varians C. Agardh and M. muscigena Iwahashi. We present illustrations of the frustules using light microscopy (LM), descriptions, and comments about the morphology of the four taxa. The analysis of Melosira muscigena under scanning electron microscopy revealed unprecedented details of the ultrastructure, such as the shape and distribution of the rimoportulae at the valve mantle. This is the first record of Melosira undulata var. undulata and the second of M. muscigena in Brazil.

Resumo O estudo do gênero Melosira em amostras de plâncton do baixo rio Iguaçu revelou a presença de quatro táxons: Melosira undulata (Ehrenberg) Kützing var. undulata, M. undulata var. normanni Arnott, M. varians C. Agardh e M. muscigena Iwahashi. Apresentam-se ilustrações das frústulas usando microscopia óptica (MO), descrições e comentários sobre a morfologia dos quatro táxons. A análise de Melosira muscigena sob microscopia eletrônica de varredura revelou detalhes sem precedentes da ultraestrutura, como a forma e distribuição das rimopórtulas no manto da valva. Este é o primeiro registro de Melosira undulata var. undulata e o segundo de M. muscigena para o Brasil.